1 如何优化工艺参数来提高细胞毒性抗体偶联药物的可放大性和生产可行性 的生产是一个复杂且昂贵的过程，需要受过培训的科学家在具有挑战性和危险性的工艺条件下安全有效地操作，以符合良好生产规范（）的要求。约的项目被外包给合同开发和生产组织（）进行开发，因此选择一个在工艺开发方面具有广泛专业知识、并能够在从早期临床研究到商业化阶段提供材料的至关重要。生产的一种常见方法是半胱氨酸共轭法，它需要三个步骤。首先是还原反应，使巯基基团可用于与细胞毒性药物连接分子结合。其次是共轭步骤，将细胞毒性药物连接分子添加进去，最后是熄灭步骤，以防止任何不需要的副反应。这个过程通常会产生一系列，其药物与抗体比例（）可以从 变化到高达 。这个生产过程使得下游处理特别困难，因为它涉及试图去除未反应的细胞毒性药物和工艺杂质，同时又要保持的关键质量属性（），如高单体纯度和最佳的种类。因此，即使在实验室规模上，开发生产和纯化工艺也非常重要，需要考虑如何控制的关键质量属性（），同时采用适用于环境的高效且可扩展的纯化技术以及分析工具箱。在生产规模上，纯化必须遵循强大且符合监管指南的安全程序。该过程还必须按照特定且常常具有挑战性的时间表运作，例如在成功提交新药临床研究申请（）后，必须及时提供足够的临床级材料，以在首次人体试验中生成安全性和疗效数据。开发这样的连接和纯化工艺的起点是确定哪些工艺条件的优化将有助于从实验室规模放大到生产规模。以下案例研究详细介绍了选择哪些工艺条件和方案作为优化目标，以及评估这些参数所提供的生产和纯化的改进结果。如何优化工艺参数来提高 细胞毒性抗体偶联药物() 的可放大性和生产可行性 作者： 卡门·朱兹博士，龙沙（Lonza）高级生物偶联科学家 2 如何优化工艺参数来提高细胞毒性抗体偶联药物的可放大性和生产可行性 材料与方法的生产在本案例研究中，客户的一位科学家已经进行了多批次的小规模实验，将的生产和纯化工艺转移到了龙沙的工艺开发团队。为了生产，半胱氨酸共轭方案与一种特定的、纯化的单克隆抗体（）稀释在缓冲液中共同使用。该过程涉及在° 下使用还原剂还原半胱氨酸二硫键，使得游离巯基可用于共轭反应。在共轭步骤中，添加了一种含有有机溶剂的特定细胞毒性药物连接分子。在共轭反应期间，药物连接分子通过马来酰亚胺反应与游离巯基结合，同时将温度保持在° 。随后加入一个熄灭剂，以防止与任何游离细胞毒性药物发生副反应。这种类型的反应预期会产生一系列具有不同药物与抗体比例（）的混合物。生产过程优化就可放大性和可生产性而言，已对的生产步骤进行了评估。还原步骤中的反应缓冲液和温度被认定为可能有益的优化参数。这些参数在实验中进行了评估，范围从 毫升扩展至升。反应缓冲液的优化在生产过程中使用缓冲液，以确保整个过程中的稳定，以及在最终配方中达到理想的值。大多数单克隆抗体通常在的范围内最为稳定，这在最终的中也经常适用。对于反应过程，最佳的取决于反应类型。对于马来酰亚胺共轭，最佳范围为。在较低的下，共轭效率降低，在较高的下可能会发生与赖氨酸残基的不良共轭。所选择的缓冲液需要在这些范围内具有较强的缓冲能力。例如，比较典型缓冲液（乙酸盐和磷酸盐）的缓冲能力，基于乙酸盐的组成适用于制备单克隆抗体或，而磷酸盐则可能是良好的反应缓冲液（见图 ）。3 如何优化工艺参数来提高细胞毒性抗体偶联药物的可放大性和生产可行性 在这个案例研究中最初使用的反应缓冲液的缓冲能力与还原和共轭过程所需的条件不相符。从工艺的稳健性角度来看，这样的设置很容易在过程中由于难以在狭窄的操作窗口内控制而带来生产挑战。有趣的是，在这项研究中，使用原始工艺的过程还产生了次优且意外的结果，高比例的不均匀种类（ 和 ）。因此，我们决定评估不同的缓冲液组成，以确定最佳的反应缓冲液来提高工艺的可生产性，并研究其对分布的影响，特别是对 和 种类的相对丰度的影响。根据其化学性质选择了一系列缓冲液组成。这些缓冲液包含磷酸盐、组氨酸或三羟甲基氨基甲烷（），并涵盖了一系列值。反应过程在模拟设施的内部...
